Мария Згурская - Орхидеи
Питательная среда может быть куплена в виде готовой смеси, так что начинающие цветоводы могут не страшиться большого списка химикатов. Инструкция прилагается (требуется лишь добавление дистиллированной воды и нагревание), и при тщательном ее соблюдении результаты должны быть положительными.
Для сеянцев обычно применяются колбы Эрленмейера емкостью 500 мл, но часто отдается предпочтение широкогорлым стеклянным флаконам. Последние могут иметь бакелитовую завинчивающуюся крышку или закупориваться резиновой пробкой. Они должны выдерживать стерилизацию и быть достаточно большими, чтобы площадь поверхности агара составляла несколько квадратных сантиметров. Можно использовать большие пробирки, хотя в них помещается меньше сеянцев. Все должно быть стерильно.
Резиновые пробки удобнее ватных. Перед употреблением их надо прокипятить в течение 15 минут. Пробка должна иметь в центре отверстие, в которое вставлен кусочек стеклянной трубки, изогнутой сверху, предназначенной для вентиляции флакона или колбы. Отогнутый вниз конец трубки закупоривается ватой. Это устройство помогает предотвратить скрытое загрязнение флакона, которое бывает при использовании пробок из ваты. Кроме того, резиновые пробки и горло колбы легче стерилизовать во время посева семян и пересадки.
Когда питательная смесь приготовлена, ее можно разливать во флаконы или колбы. Они могут быть наклонены и тогда дают несколько большую площадь поверхности, или стоять прямо, в зависимости от желания. Если вы предпочитаете сосуды наклонные, соорудите специальную подставку. Для разливания агара используйте воронку с длинной трубкой, чтобы она проникала в глубь колбы и предотвращала попадание агара на стенки и, что более важно, на горло. Это существенно, т. к. иначе будут прилипать пробки и появятся дополнительные места, где может развиваться плесень. Толщина слоя агара должна составлять около 3,5–4 см.
Флаконы и колбы следует закупорить перед стерилизацией. Навинчивающиеся крышки должны быть туго затянуты, а затем ослаблены на четверть оборота.
Для стерилизации в домашних условиях можно воспользоваться скороваркой или, если ее нет, водяной баней. В любом случае вы должны быть уверены, что вода не попадет в колбу. В скороварке для стерилизации будет достаточно 20 минут. При использовании водяной бани установите уровень воды на уровень агара в колбах, чтобы вода при кипении не намочила верх. Стерилизацию в закрытой кастрюле производите в течение часа. Затем выньте еще горячие колбы, слейте воду из кастрюли или скороварки, быстро поставьте флаконы обратно и накройте чистой тканью. Это даст им возможность остывать без риска заражения. Если условия позволяют, держите их так вплоть до употребления, а готовы они будут к употреблению, как только остынут и агар превратится в желе.
Посев семянЭтот процесс столь прост, что рассказ о нем занимает больше времени, чем он сам. На самом деле, все процедуры не трудны, и если составлено детальное их описание, вам остается лишь проделать их шаг за шагом и убедиться, что это действительно легко. Когда вы проделаете это во второй раз, то даже удивитесь, как могли подумать, что это сложно.
Посев семян состоит из двух главных шагов: во-первых, дезинфекция семян путем замачивания в растворе антисептика и, во-вторых, размещение семян, находящихся во взвеси, понемногу в каждую колбу. Чистота – важнейшее условие. Воздух наполнен спорами плесени. Даже если вы ненадолго открываете стерильную колбу, чтобы разместить в ней семена, необходимо принять все меры предосторожности, чтобы не занести инфекцию. Хорошо бы над рабочей поверхностью повесить влажные полотенца в качестве средства против пыли; эта защита действует эффективнее, если смочить их в 10 %-ном растворе хлорокса; затем можно приступать к процессу проращивания семян, используя один из нижеприведенных методов.
Метод 1. Вам потребуется следующее оборудование: пузырек с пробкой, новая медицинская пипетка, стакан или чашка, мензурка на 100 мл, две пустые бутылки, бумажный фильтр, стеклянная воронка, открытое пламя (газовая горелка или спиртовка) и нож. На семенах могут быть споры плесени, и, следовательно, они должны быть продезинфицированы. Для этой цели обычно применяют раствор гипохлорита кальция. Купите его в аптеке и храните плотно закупоренным в холодильнике. Для приготовления раствора положите 10 г твердого гипохлорита кальция в бутылку и добавьте 140 мл дистиллированной воды. Старательно встряхните и оставьте на час, встряхивая время от времени. Затем отфильтруйте раствор в другую бутылку. Использовать его лучше сразу, пока он свежий.
Наполните маленький пузырек на 2/3 раствором и добавьте немного семян. Количество семян, умещающееся на кончике ножа, хватает, чтобы засеять 10–12 флаконов. (Нож, естественно, должен быть стерилизован в пламени горелки и охлажден.) Плотно закупорьте пузырек. Необходимо, чтобы семена как следует намокли в растворе гипохлорита кальция, для чего встряхивайте пузырек в течение, по меньшей мере, двадцати минут, чтобы разрушить мельчайшие пузырьки воздуха, окружающие семена.
Пока вы встряхиваете семена, налейте немного оставшегося раствора гипохлорита кальция в чашку и положите туда пипетку, наполнив ее раствором до конца стеклянного баллона. Нужно также подготовить оборудование, собрав его вместе: колбы, все еще находящиеся в закрытом контейнере, чашку с капельницей, а также миску с 10 %-ным раствором хлорокса для дезинфекции вынутых во время посева пробок.
Когда семена продезинфицированы, приступайте к посеву во флаконы. В первый раз легче работать с помощником – для того чтобы держать колбы или опускать в них семена, – но при необходимости вы сможете управиться и в одиночку. Последующие операции должны выполняться быстро, чтобы колбы оставались открытыми как можно меньшее время.
Возьмите одну колбу из закрытого контейнера, выньте пробку и положите ее в миску с хлороксом. Семена могут частично подняться на поверхность в пузырьке, а частично находиться на дне, поэтому не пытайтесь собрать все одной пипеткой. Их следует быстро переместить, опустив пипетку на дно и выдавливая из нее воздух. Пузырьки будут перемешивать жидкость и семена, и вы сможете набрать несколько капель смеси для переноса в колбу. Держите пипетку в горле колбы так, чтобы капли не попадали на стенки сосуда. Нормальное количество – 4 капли на колбу; если вы будете слегка двигать капельницу по кругу, вы сможете разместить эти капли в разные места. Когда семена посеяны, возьмите пробку из миски, дайте стечь излишкам хлорокса, чтобы ничего не попало в колбу, и закупорьте ее.
Когда все колбы будут засеяны, каждую из них слегка покачайте, чтобы распределить семена по поверхности агара. Навинченные крышки или пробки должны быть обернуты, лучше всего фольгой, а затем обвязаны тесьмой. Проверьте, все ли колбы надписаны.
Одна-две колбы могут инфицироваться во время посева, и в них через несколько дней появится плесень. Надо надеяться, что это случится не со всеми сосудами. Если вы работаете очень аккуратно, можно попытаться отделаться от пятна плесени, когда оно еще маленькое. Протрите горлышко, ободок и пробку 10 %-ным хлороксом. Простерилизуйте длинный инструмент и, подготовив рабочее место, как для посева, откройте колбу, вырежьте пятно вместе с агаром и осторожно извлеките его. Не прикасайтесь к стенкам колбы, иначе плесень появится снова. Закупорьте колбу. Чем быстрее вы все это проделаете, тем меньше шансов повторного заражения. По мере приобретения вами опыта заражение будет встречаться реже.
Метод 2 состоит в применении шприца для подкожных инъекций. Взвесь с семенами набирается в стерильный шприц (необходима игла с крупным калибром отверстия). Затем игла окунается в 10 %-ный хлорокс и вставляется между ватой и стеклом в трубку, и семена выдавливаются в колбу. В случае прилипания семян к игле нужно добавить в дезинфицирующий раствор в пузырьке немного теплого 10 %-ного раствора агара. После посева пробка должна быть завернута в фольгу.
Метод 3 предполагает использование проволочной петли для посева семян, преимущества которой заключаются в том, что семена извлекаются с очень незначительным количеством дезинфицирующего раствора, и у опытного цветовода семена равномерно располагаются на агаре. Это особенно удобно для извлечения из пузырька семян, прилипших к стенкам, например, семян цимбидиума.
Сеянцы в колбах с агаромОдин конец чистой химически инертной проволоки сворачивается в петлю около 5 мм в диаметре, а другой – прикрепляется к длинной рукоятке. Когда петля погружается во взвесь семян, а затем вынимается, покрывающая ее пленка жидкости удерживает их порядочное количество. Для всплывающих семян петля погружается лишь в верхние слои жидкости. Когда семена лягут на дно, можно слить раствор, оставив их на дне пузырька.
Петля стерилизуется в пламени и полностью охлаждается перед прикосновением к семенам. Для гарантии охлаждения можно опустить ее в другой пузырек с дезинфицирующим раствором. Чтобы посеять семена, петлю немного погружают в агар, точнее говоря, не в сам агар, а во влагу, выделяющуюся на его поверхности.
